- 3 -
(продолжение заключения эксперта № 7/1351 от 08.11.2022)
[Внешний вид фрагмента ребра с мягкими тканями, представленного на исследование (иллюстрация № 3)]
Исследование ДНК
Выделение ДНК
ДНК из объекта № 1, выделяли используя набор реагентов для экстракции ДНК человека «CorDIS Экстракт», производства фирмы «ООО «ОРДИС», Россия, в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией пользователя «3.5 выделение ДНК из костной ткани».
Раствор ДНК готов для проведения реакции амплификации.
Оценка выделенной ДНК
Для количественной и качественной оценки выделенной ДНК применяли полимеразную цепную реакцию в реальном времени с использованием набора реагентов «Investigator® Quantiplex® Pro Kit» («QIAGEN») в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией. Реакцию амплификации и флуоресцентно-детекцию меченых амплифицированных фрагментов проводили с помощью прибора «7500 Real-Time PCR System», фирмы «Applied Biosystems», США. Обработку полученных данных проводили с помощью программы «HID Real-Time PCR Analysis Software Version 1.1». Результаты по определению концентрации ДНК в пробах, представлены в таблице 1.
Таблица № 1
Концентрация ДНК в пробах
[таблица: Объект № 1 / Концентрация ДНК человека нг/мкл = 0,031 / Концентрация мужской ДНК нг/мкл = 0,026; Отрицательный контроль выделения / - / -]
Согласно данным о чувствительности для проведения исследования локусов ядерной ДНК концентрация ДНК должна быть не менее 0,0062 нг/мкл.
Установлено, что в пробе ДНК (объект № 1) содержится ДНК человека в количестве, достаточном для исследования ядерной ДНК.
Таким образом, установлено, что проба ДНК (объект № 1) пригодна для исследования ядерной ДНК.
Исследование локусов ядерной ДНК
Для исследования локусов ДНК применяли полимеразную цепную реакцию (ПЦР), используя набор реагентов «Investigator® 24plex QS Kit» производства фирмы «QIAGEN» с локусами Amelogenin, TH01, D3S1358, vWA, D21S11, TPOX, DYS391, D1S1656, D12S391, SE33, D10S1248, D22S1045, D2S1338, D16S539, D2S441, D18S51, FGA, QS1, D16S539, CSF1PO, D13S317, D5S818, D7S820, QS2, в соответствии с инструкцией, представленной производителем реагентов.