6
(продолжение заключения эксперта № 7/1355 от 21.10.2022)
Таким образом, в объектах № 1 и № 2 обнаружен пот, в объектах № 3, № 4 пот не обнаружен.
3. Установление наличия эпителиальных клеток
Объекты № 1 - № 4 заливали дистиллированной водой (1мл) и экстрагировали в течение 18 часов при температуре 4°С. После чего извлекали предметы-носители из пробирок, а экстракты центрифугировали в течение 5 минут при скорости 15000 об/мин. Осадки переносили на обезжиренные предметные стёкла, подсушивали при комнатной температуре, фиксировали этанолом в течение 15 минут и окрашивали азур-эозином по методу Паппенгейма (соотношение красителей 1:0,3:5:1,5) в течение 45 минут. Затем препараты промывали в проточной воде и подсушивали. Окрашенные препараты исследовали с помощью микроскопа «AxioScope A1» с использованием окуляров 10x, объектива 100° с масляной иммерсией и проходящим светом.
В препаратах (объекты № 1 – № 4) на фоне незначительного количества посторонних примесей и микробной флоры обнаружены эпителиальные клетки.
4 Установление наличия слюны
Установление наличия слюны человека проводили с помощью иммунохроматографического стрип-теста «SERATEC Ameilaset Test», фирмы SERATEC, в соответствии с прилагаемой к тесту инструкцией. При исследовании объекта № 4 результат тестов положительный. Проявление контрольных полосок тестов подтвердило достоверность полученных результатов.
При исследовании объектов № 1 - №3 результат тестов отрицательный. Проявление контрольных полосок тестов подтвердило достоверность полученных результатов.
Таким образом, в объекте № 4 обнаружена слюна человека, а в объектах № 1 – № 3 слюна человека не обнаружена.
5. Исследование ДНК
5.1. Выделение ДНК
ДНК из объектов № 1 - № 4 выделяли с помощью прибора «AutoMate Express Instruments», производства фирмы «Applied Biosystems», США, используя набор реагентов «PrepFiler™ Forensic DNA Extraction Kit», производства фирмы «Applied Biosystems», США, в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией.
Раствор ДНК готов для проведения реакции амплификации.
5.2. Оценка выделенной ДНК
Для количественной оценки ДНК применяли полимеразную цепную реакцию в реальном времени, используя набор реагентов «Investigator Quantiplex Pro®», фирмы QIAGEN, в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией. Реакцию амплификации и детекцию проводили с помощью прибора «7500 Real-Time PCR System», фирмы «Applied Biosystems», США. Обработку полученных данных проводили с помощью программы «HID Real-Time PCR Analysis Software v. 1.1.».
Результаты по концентрации ДНК приведены в таблице № 1.