- 4 - (продолжение заключения эксперта № 7/1340 от 20.10.2022) ДНК человека CorDIS «Экстракт», производства фирмы ООО«ГОРДИЗ», Россия, в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией пользователя «3.5 выделение ДК из костной ткани». Раствор ДНК готовы для проведения реакции амплификации. Оценка выделенной ДНК Для количественной и качественной оценки выделенной ДНК применяли полимеразную цепную реакцию в реальном времени с использованием набора «Investigator® Quantiplex® Pro Kit» («QIAGEN») в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией. Реакцию амплификации и детекцию флуоресцентно меченых амплифицированных фрагментов проводили с помощью прибора «7500 Real-Time PCR System» («Applied Biosystems», США). Обработку полученных данных производили с помощью программы «HID Real-Time PCR Analysis Software Version 1.1». Результаты по определению концентрации ДНК в пробах, представлены в таблице № 1. Таблица № 1 Концентрация ДНК в пробах [таблица: Концентрация ДНК в пробах, Объект № 1 / Объект № 2 / Отрицательный контроль выделения, ~3 строки данных] Согласно данным о чувствительности для проведения исследования локусов ядерной ДНК концентрация ДНК должна быть не менее 0,00625 нг/мкл. Установлено, что в пробах ДНК (объекты №№1-5) содержится ДНК человека в количестве, достаточном для исследования ядерной ДНК. Таким, образом, установлено, что пробы ДНК (объекты №№1,2) пригодны для исследования ядерной ДНК. Исследование локусов ядерной ДНК Для исследования локусов ДНК применяли полимеразную цепную реакцию (ПЦР), используя набор реагентов «Investigator® 24plex QS Kit» производства фирмы «QIAGEN» с локусами Amelogenin, TH01, D3S1358, vWA, D21S11, TPOX, DYS391, D1S1656, D12S391, SE33, D10S1248, D22S1045, D19S433, D8S1179, D2S1338, D2S441, D18S51, FGA, QS1, D16S539, CSF1PO, D13S317, D5S818, D7S820, QS2» в соответствии с инструкцией, представленной производителем реагентов. Реакцию амплификации проводили с помощью прибора «QIAamplifier 96» фирмы «QIAGEN». Для оценки специфичности реакции амплификации использовали положительный контроль (проба ДНК с известными генетическими признаками ДНК 9948) и пробу без ДНК (отрицательный контроль). Разделение и детекцию флуоресцентно меченых амплифицированных фрагментов осуществляли с использованием генетического анализатора «HONOR 1616», производства компании «Nanjing Superyears Gene Tehnology», КНР в среде полимера POP4. Определение длин амплифицированных фрагментов и установление номеров аллелей проводили на основе внутреннего стандарта длины ДНК Size Standard 24plex (BTO) и DNA Size Standard 550 BTO входящих в набор реагентов аллельных лэддеров с помощью программы GeneMapperID-X v 1.4. Данные анализа электрофореграмм представлены в приложении. Результаты исследования локусов ДНК, выделенной из ребра (объект № 1) и второго ребра (объект № 2) представлены в таблице № 2.