(продолжение заключения эксперта №7/1407 от 05.12.2022 г.) Установление наличия эпителиальных клеток Вырезки из объектов № 1 – № 6 заливали 1 мл дистиллированной воды (1 мл) и экстрагировали в течение 15 минов при температуре 4°С. После чего извлекали предметно-носители из пробирок и центрифугировали в течение 5 минут при скорости 15000 об/мин. Осадки переносили на обезжиренные предметные стекла, подсушивали и окрашивали азурэозиновой смесью (водно-дистиллированная вода – άтр в соотношении 1:3,5) в течение 45 минут. Затем препараты промывали в проточной воде и подсушивали. Окрашенные препараты исследовали с помощью микроскопа «Микромед-МС», окулярная система 10х, объективы 100х. Препараты иммерсионного масла измерены и подсушены. В препаратах (объекты № 1 – № 5) на фоне значительного количества посторонних примесей обнаружены единичные эпителиальные клетки. В препарате (объект № 6) эпителиальные клетки не обнаружены. Установление наличия пота Полученные ранее при исследовании экстракты лейкоцитных клеток объектов № 1 – № 6 исследовали методом восходящей тонкослойной хроматографии. Экстракты наносили на пластинку для тонкослойной хроматографии в системе н-бутанол – ледяная уксусная кислота – вода (4:1:2). В качестве «свидетеля» использовали 0,01% раствор серина. Пластинку после хроматографии проявляли при температуре 60 °С с помощью 0,1%-ным спиртовым раствором нингидрина. При хроматографическом результате (наличие зон сине-фиолетового окрашивания с Rf = 0,25) наблюдали с образцом пота, что свидетельствует о наличии серина. Отрицательный результат (отсутствие зон сине-фиолетового окрашивания с Rf = 0,25) наблюдали с объектами № 1 – № 6, что свидетельствует об отсутствии серина. Таким образом, в объектах № 1 – № 6 пот не обнаружен. Выделение ДНК ДНК из объектов № 1 – № 6 выделяли с помощью набора реагентов «COrDIS Экстракт», производства фирмы «GORDIZ», процедура выполнялась согласно набору инструкций. Процедуру проводили трократо. В процессе выделения ДНК также проводили пробу без объекта исследования (отрицательный контроль выделения). Растворы ДНК готовы для проведения реакции амплификации. Оценка выделенной ДНК Для количественной и качественной оценки выделенной ДНК применяли полимеразную цепную реакцию в реальном времени с использованием набора реагентов «Investigator® Quantiplex® Pro» («Qiagen», Германия) в соответствии с инструкциями к набору реагентов. Реакцию амплификации и детекцию флуоресцентно меченых амплификационных фрагментов проводили с помощью прибора «7500 Real-Time PCR Systems» («Applied Biosystems», США) и программой «HID Real-Time PCR Analysis Software Version 1.1». Результаты по определению концентрации ДНК в пробах, выделенных из объектов № 1 – № 6 представлены в таблице № 1. [таблица: Таблица №1 — концентрации ДНК человека/мужской ДНК в пробах из объектов 1–6, ~8 строк, OCR нечитаем частично]