(«-» - ДНК не выявлена.)
Согласно данным о чувствительности для проведения исследования локусов ядерной ДНК концентрация ДНК должна быть не менее 0,0062 нг/мкл.
Установлено, что в объекте № 1 содержится ДНК в количестве, достаточном для дальнейшего исследования. В пробе (отрицательный контроль выделения) ДНК человека не выявлена.
Таким образом, установлено, что образец ДНК (объект № 1) пригодна для исследования ядерной ДНК.
2.3. Исследование локусов ядерной ДНК.
Для исследования локусов ДНК применяли полимеразную цепную реакцию (ПЦР), используя набор реагентов «Investigator® 24plex QS Kit» производства фирмы «QIAGEN» с локусами Amelogenin, TH01, D3S1358, vWA, D21S11, TPOX, DYS391, D1S1656, D12S391, D2S1338, SE33, D10S1248, D22S1045, D19S433, D18S51, FGA, QS1, D16S539, CSF1PO, D13S317, D7S820, QS2, в соответствии с инструкцией, представленной производителем реагентов. Реакцию амплификации проводили с помощью прибора «QIAamplifier 96» фирмы «QIAGEN». Для оценки специфичности реакции амплификации использовали положительный контроль (проба ДНК с известными генетическими признаками ДНК 9948) и пробу без ДНК (отрицательный контроль).
Разделение и детекцию флуоресцентно-меченых амплифицированных фрагментов проводили с использованием прибора капиллярного электрофореза «Honor 1616», производства компании «Nanjing Superyears Gene Technology Co LTD» (КНР) в среде полимера POP4. Определение длин амплифицированных фрагментов и установление номеров аллелей проводили на основе внутреннего стандарта длины (S2.0 standard 24plex (BTO)) и входящих в набор реагентов аллельных лёдеров с помощью программного комплекса Gene Mapper ID-X v 1.4.
Данные анализа электрофореграмм представлены в приложении.
Результаты исследования локусов ДНК, установленные генотипы¹:
Таблица 2.
[таблица: результаты исследования локусов ДНК; Объект: Образец буккального эпителия █████████ В.В. (объект № 1); Положительный контроль 9948; Отрицательный контроль; локусы Amelogenin, TH01, D3S1358, vWA, D21S11, TPOX, DYS391, D1S1656, D12S391, ~20 строк; OCR нечитаем в деталях]
Amelogenin: X, Y; X,Y
TH01: 9,3; 8,13,3
D3S1358: 17,17; 15,17
vWA: 23,22; 17,17
D21S11: 29,22; 29,30
D2S441: [нечитаемо]; [нечитаемо]
DYS391: 10,11; [нечитаемо]
D1S1656: 13, 18.3; 14, 17
D12S391: 19, 22; 18, 24
А.В. Хоменко