(продолжение заключения эксперта № 7/1345 от 08.11.2022)
Внешний вид фрагмент полимерного материала и пять фрагментов мягких тканей,
представленных на исследование (иллюстрация № 3)
Исследование ДНК
Выделение ДНК
ДНК из объектов №№1-5, выделяли используя набор «реагентов для экстракции ДНК человека CorDIS Экстракт», производства ООО«ГОРДИЭ», Россия, в соответствии с прилагаемой к набору инструкции пользователя: «3.5 выделение ДНК из костной ткани».
Раствор ДНК готов для проведения реакции амплификации.
Оценка выделенной ДНК
Для количественной и качественной оценки выделенной ДНК применяли полимеразную цепную реакцию в реальном времени с использованием набора «Investigator® Quantiplex® Pro Kit» (от «QIAGEN») в соответствии с прилагаемой к набору инструкцией пользователя. Реакции амплификации и детекцию флуоресценции амплифицированных фрагментов проводили с помощью прибора «7500 Real-Time PCR System» («Applied Biosystems», США). Обработку полученных данных проводили с помощью программы «HID Real-Time PCR Analysis Software Version 1.1». Результаты по определению концентрации ДНК в пробах, представлены в таблице № 1.
Концентрация ДНК в пробах
Таблица № 1
Объекты исследования | Концентрация ДНК человека, нг/мкл | Концентрация мужской ДНК, нг/мкл
Объект № 1 | 6,360 | 7,652
Объект № 2 | 2,686 | 3,356
Объект № 3 | 1,436 | 1,828
Объект № 4 | 1,115 | 1,387
Объект № 5 | 1,115 | 1,203
Отрицательный контроль | - | -
+ - «ДНК не выделена»
Согласно данным о чувствительности для проведения исследования локусов ядерной ДНК концентрация ДНК должна быть не менее 0,0625 нг/мкл.
Установлено, что в пробах (объекты №№ 1-5) содержится ДНК человека в концентрации, достаточной для исследования ядерной ДНК.
Таким образом, установлено, что пробы ДНК объектов №№ 1-5 пригодны для исследования ядерной ДНК.